2017 год, №5

Содержание выпуска
Иммунологическая память - одна из ключевых функций адаптивного иммунитета, позволяющая организму противостоять инфекциям, предотвращать развитие онкологических и аутоиммунных заболеваний. Важнейшее свойство иммунологической памяти - это способность с помощью предсуществующих антиген-специфичных клонов B- и T-клеток быстро и эффективно реагировать на патоген, с которым у организма был контакт в прошлом. Наличие долгоживущих популяций клеток, надежно распознающих инфекционные агенты, позволяет использовать вакцинацию в качестве главного элемента превентивной медицины. На уровне сообщества людей иммунологическая память отдельных индивидуумов определяет феномен популяционного (коллективного) иммунитета, который чрезвычайно важен для обеспечения биобезопасности в масштабе государства. В обзоре описаны актуальные исследования популяционного иммунитета в контексте вакцинопрофилактики. Рассматриваются принципы организации серологических исследований, опыт серологического мониторинга в различных странах, существующие и перспективные аналитические подходы к изучению иммунологической памяти. Обсуждаются недостатки принятых в России способов оценки популяционного иммунитета и предлагается к реализации система сероэпидемиологического мониторинга.
В настоящее время единственной применяемой в мире вакциной против туберкулеза является БЦЖ - живой аттенуированный штамм . Она защищает детей от милиарного туберкулеза и туберкулезного менингита, но не уберегает взрослых от легочного туберкулеза и реактивации латентной формы инфекции. Для повышения эффективности вакцины БЦЖ у взрослых и подростков разрабатываются рекомбинантные бустерные вакцины, несущие антигены как , так и . В статье приводятся первые данные о безопасности и иммуногенности кандидатной рекомбинантной вакцины для профилактики туберкулеза «ГамТБвак». Изучали иммуногенность препарата на 12 добровольцах. Оценку проводили по изменению у испытуемых параметров клеточного и гуморального иммунитета (методами IGRA-тест и мультиплексный иммунологический xMAP анализ соответственно) в течение 20 нед. после введения препарата. На 140-й день с момента первой вакцинации у 10 (83 %) из 12 иммунизированных «ГамТБвак» добровольцев сохранялся положительный клеточный ответ на все антигены, входящие в состав вакцины, по сравнению с уровнем до вакцинации. Оба смысловых антигена CFP10 и ESAT6 индуцировали достоверную выработку IgG антител с 98-го и 140-го дней наблюдения соответственно. Антиген Ag85A вызывал сравнительно низкий гуморальный ответ. В целом, изучаемая рекомбинантная вакцина «ГамТБвак» обладает необходимым уровнем безопасности и активирует клеточное и гуморальное звенья адаптивного иммунитета, формирует клеточную память.
Клеточный иммунитет и цитокин интерферон гамма (ИФН-γ) имеют важное значение для формирования устойчивос- ти организма к микобактериям туберкулеза (МБТ), но точный механизм появления иммунитета к туберкулезу (ТБ) неизвестен. В исследовании оценивали иммуный ответ при развитии ТБ и связь полиморфизма (T-1488C) гена с выраженностью специфических иммунологических реакций у детей. Участниками исследования стали 310 детей до 18 лет, распределенные по 3 группам: группа ТБ - 110 детей с установленным по результатам комплексного обследования ТБ; группа ЛТИ - 156 детей с установленной латентной туберкулезной инфекцией; группа НТ - 44 ребенка, не инфицированные МБТ. Проводили иммунологические и молекулярно-генетические исследования, в частности, оценивали иммунный статус пациентов и распределение частот генотипов по изучаемому полиморфизму, в том числе в контексте эффективности вакцинирования против ТБ. Иммуный статус детей с ЛТИ характеризовался лишь слабо выраженной активацией клеточного иммунитета, а детей с ТБ - появлением у воспалительного процесса черт хронического за счет недостаточной функциональной активности клеток иммунной системы (p < 0,05). При оценке иммуного ответа по уровню синтеза ИФН-γ, индуцированного специфическими митогенами (PPD-L, CFP32B, Rv2660c, ESAT6, 85a и ESAT6-CFP10), установили снижение ответа у больных ТБ, которое было ассоциировано с гетерозиготным генотипом по полиморфизму гена (p < 0,05). При гомозиготных генотипах ТТ и СС ответ усиливался. Также установили, что низкая эффективность противотуберкулезной вакцинации также связана с гетерозиготным генотипом (50 %), а высокая - с генотипом, гомозиготным по аллелю Т (40 %), что может свидетельствовать о его протективной роли. Полученные результаты указыают на то, что изучаемый полиморфизм (гетерозиготный генотип) можно рассматривать в качестве маркера развития туберкулезной инфекции у детей.
Скрининговые мультиплексные тест-системы для оценки уровня содержания антител к вакциноуправляемым инфекциям активно используются в масштабных сероэпидемиологических исследованиях. Между тем, они отсутствуют в виде коммерчески доступных продуктов, т. к. задачи подобных исследований достаточно узкоспецифичны и ограничены разовым применением таких наборов. В результате исследователи должны самостоятельно разрабатывать и внедрять мультиплексные тест-системы при изучении иммунологической памяти населения. В работе обсуждаются теоретические и практические основы разработки мультиплексных скрининговых тест-систем, приводятся протоколы и рекомендации, основанные на практическом опыте авторов.
В условиях формирования «вакцинозависимости» современного общества приоритетным является изучение популяционного иммунитета, основанное на оценке распространенности антител к той или иной инфекции в крови доноров из различных, в том числе индикаторных, групп населения. В работе представлены данные о фактической восприимчивости россиян к таким вакциноуправляемым инфекциям, как корь, краснуха и эпидемический паротит. В качестве материала для исследования использовали образцы сывороток крови из Банка сывороток крови Национального исследовательского центра эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н. Ф. Гамалеи (Москва): 866 образцов, в том числе 293 и 117 образцов от медицинских работников, полученных в 2011 г. и 2017 г. соответс- твенно, 220 образцов от военнослужащих, полученных в 2016-2017 гг., и 236 образцов от условно здоровых доноров, полученных в 2016 г. Все образцы были исследованы методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием предназначенных для изучаемых инфекций тест-систем компании «Вектор-Бест» (Россия). Была выявлена значительная доля восприимчивых к кори (в среднем - 19,4 %) и эпидемическому паротиту (в среднем - 28,8 %) лиц, что не соответствует критерию эпидемического благополучия для этих инфекций (7 и 15 % соответственно) и создает условия для распространения инфекций в случае попадания возбудителей на территорию страны. Доля восприимчивых к краснухе людей составила в среднем 6,5 %, что отвечает критерию эпидемического благополучия (7 %).
Изучение роли иммунологической памяти, опосредованной Т-лимфоцитами, при злокачественных опухолях и их лечении - актуальная научная задача. Целью исследования была оценка роли Т-клеток иммунологической памяти в формировании противоопухолевого иммунитета у больных раком яичников на этапе неоадъювантного лечения, включающего химиоиммунотерапию с применением рекомбинантного интерферона-гамма (рИФНγ). Методы: проточная цитометрия для определения центральных (Tсm) и эффекторных (Tеm) Т-клеток памяти (Тm) и наивных Т-лимфоцитов (Th0). Результаты: в крови больных по сравнению с донорами обнаружено высокое (Тm) и низкое (Тh0) содержание Т-клеток среди CD4 и CD8 субпопуляций. В асцитической жидкости происходило накопление Тm, превышающих количество Th0 в 7,7 раза в субпопуляции CD4 и в 6,5 раза в субпопуляции CD8, в которой Tеm преобладали над Tсm. После химиотерапии с препаратом рИФНγ в крови больных выявлено снижение уровня Тh0, в крови и в асцитической жидкости - преобладание Tсm среди CD8 Tm, а у больных, получавших химиотерапию без иммунотерапии, преобладали Tеm. Данные различия были расценены как благоприятные, поскольку сопровождались положительной клинической динамикой: меньшей частотой рецидивирования (46,7 против 80 % в контроле) и более длительным безрецидивным периодом (17,5 ± 1,6 против 11,3 ± 1,5 мес. в контроле). Таким образом, химиоиммунотерапия вызывает перераспределение субпопуляций Т-клеток в крови и в асцитической жидкости при раке яичников в сторону преобладания Tсm над Tеm, что может быть одним из механизмов действия препарата «Ингарон» (рИФНγ).
Мерзляк Е. М., Касацкая С. А., Сосновская А. В., Израельсон М. А., Староверов Д. Б., Наконечная Т. О., Новиков П. И., Чудаков Д. М., Британова О. В.
Стр. 74 — 80
Механизмы развития аутоиммунных васкулитов и полиангиитов мало изучены, однако известно, что патогенез этих заболеваний в значительной степени опосредуется Т-лимфоцитами. Циклофосфамид (ЦФ) широко используется для лечения аутоиммунных заболеваний. Клетки лимфоидного ряда (Т, В и NK-клетки), и в особенности наивные Т-лимфоциты, обладают высокой чувствительностью к ЦФ. Мы проанализировали репертуары Т-клеточных рецепторов (T-cell receptors, TCRs) периферической крови молодых (24-35 лет, n = 4) и пожилых (52-68 лет, n = 5) пациентов с синдромами Вегенера и Чарга-Стросса, получавших не ранее чем за 3 года до начала исследования ЦФ в высоких дозах. В контрольную группу включили здоровых доноров: 7 молодых и 14 пожилых людей. Мы не выявили описанных ранее вариантов TCRs, характерных для ANCA-ассоциированных васкулитов. Представленность «публичных» (часто встречающихся в популяции, в значительной степени формирующихся в эмбриональном периоде) вариантов TCRs в репертуарах молодых пациентов оказалась существенно ниже, чем в репертуарах здоровых доноров того же возраста, и была близка к таковой пожилых здоровых доноров. Мы предполагаем, что терапия высокими дозами ЦФ элиминирует значительную часть наивных Т-лимфоцитов молодых доноров, содержащих публичные варианты TCR эмбрионального происхождения. Отдаленные последствия таких изменений в структуре Т-клеточного иммунитета требуют дальнейшего изучения.
Детальное изучение механизмов формирования иммунного ответа против вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) необходимо для лучшего понимания процессов развития иммунодефицита у пациентов с ВИЧ-инфекцией, разработки эффективных методов ее иммунотерапии и новых вакцин против вируса. В исследовании нами были проанализированы данные ранее полученных результатов секвенирования репертуаров Т-клеточных рецепторов для большого числа здоровых индивидуумов (601 донор из американской популяции и 65 доноров из российской популяции) с целью определения частоты наивных Т-лимфоцитов, обладающих специфичностью к ВИЧ, в популяции. Мы обнаружили, что на уровне популяции имеет место значительная вариабельность между различным эпитопами ВИЧ в частотах специфичных Т-клеток (F-statistic = 2007, p < 10-100, ANOVA). Несмотря на то, что частота Т-лимфоцитов, специфичных к одному и тому же эпитопу, была достаточно стабильной между индивидуумами, мы обнаружили, что она значительно зависит от таких факторов, как наличие у человека определенных аллелей HLA (p < 0,01, пост-хок тест Тьюки), наличие цитомегаловирусной инфекции (F = 61, p = 7 × 10-15, ANOVA), а также возраст (коэффициент корреляции Пирсона в диапазоне от -0,53 до -0,14 для разных групп).
Доброхотова Ю. Э., Фрипту В. Г., Гришин И. И., Сапрыкина Л. В., Мазур И. А.
Стр. 88 — 93
Предменструальный синдром (ПМС) - патология, которая может значительно ухудшать качество жизни женщины, влияя на ее физическое и эмоциональное состояние. Целью исследования являлось определение особенностей болевых проявлений при ПМС у женщин репродуктивного возраста (18-45 лет). В основную группу включили 136 женщин с ПМС средней/тяжелой степени, в контрольную - 136 здоровых женщин с единичными предменструальными симптомами. Для оценки болевых проявлений использовали Менструальный дистресс-опросник Рудольфа Муса, менструальный дневник (в течение 3 последовательных циклов) и визуальную аналоговую шкалу (позволяет оценить интенсивность болей). Средняя общая оценка по дистресс-опроснику в основной группе составила 47,14 ± 3,67 балла (ПМС средней тяжести), а в контрольной - 10,28 ± 1,94 балла (ПМС легкой степени) (p < 0,05). Среди болевых предменструальных симптомов встречались: головные боли - в 66,17 % случаев в основной группе и в 22,79 % случаев в контрольной группе (p ˂ 0,001); тяжесть/боль в молочных железах - в 83,08 % и 49,26 % случаев (p < 0,001); тазовые боли - в 70,58 % и 35,29 % случаев (p ˂ 0,001); вздутие/боли в животе - в 64,7 % и 25,73 % случаев (p < 0,001); боли в мышцах и суставах - в 51,47 % и 21,32 % случаев соответственно (p < 0,001). В среднем в основной группе у пациенток отмечали 5,62 ± 0,92 предменструальных симптома, из них 2,47 ± 0,68 были болевыми выраженной интенсивности, определяя степень тяжести ПМС. Полученные результаты указывают на то, что симмптомы ПМС следует подтверждать проспективными ежедневными оценками в течение не менее 2 последовательных циклов, т. к. ретроспективный анамнез не является достаточно надежным.
Тахчиди Х. П., Качалина Г. Ф., Касмынина Т. А., Тебина Е. П.
Стр. 94 — 98
Идиопатическая эпиретинальная мембрана (иЭРМ) - наиболее распространенная патология витреоретинального интерфейса. Для этой патологии характерно бессимптомное течение на протяжении достаточно длительного времени. «Золотым стандартом» ее диагностики является исследование с помощью спектральной оптической когерентной томографии (СОКТ) и офтальмобиомикроскопия. Однако к настоящему времени разработаны и другие подходы к выявлению патологий глазного дна, обладающие важными достоинствами: мультиспектральное исследование в режиме MultiColor (оценка распространенности пролиферативного процесса), ОКТ-ангиография в режиме En Face (точная локализация повреждений ретинальных слоев), компьютерная микропериметрия (оценка качества зрения и влияния на него пролиферативного процесса). В исследовании оценивалась эффективность мультимодального подхода в диагностике иЭРМ. Обследовали 46 пациентов (46 глаз; средний возраст - 65,3 ± 11,2 года) с иЭРМ различных стадий, артифакией и начальной катарактой. По результатам обследования у 15 пациентов установили иЭРМ стадии 0, у 19 - стадии 1, у 12 - стадии 2. Применение мультимодального подхода позволило точнее дифференцировать стадии заболевания, а в группе пациентов с иЭРМ стадии 2 также в 2 случаях - разработать карту витреоретинального интерфейса для выбора тактики лечения и плана малотравматичного для сетчатки хирургического вмешательства. Основываясь на собственном клиническом опыте и результатах исследования, мы полагаем, что мультимодальный подход перспективен для более широкого распространения в клинической практике офтальмологов.